越冬室的相对湿度要保持在 75%～ 85%之间。越冬室太干燥或太潮湿都不利于蜂群安全越冬。湿度过高，未封盖的蜜脾会吸水变质，影响蜂群健康。
过于干燥的越冬室，同样对蜜蜂有害。干燥的空气能吸收蜂蜜中的水分，促使蜂蜜结晶，并会使蜜蜂感到口渴，过多地吃蜜，导致蜜蜂后肠积粪增多。
如越冬室内干燥，可以在室内悬挂浸湿的麻袋，或向地上洒水，关闭出气孔，打开进气孔。湿度大，室温高时，要关闭进气孔，打开出气孔，甚至装排风扇，排出湿气。